組織処理の必需品: 初期段階から固定の重要な役割まで

組織処理は、顕微鏡研究のために生物学的サンプルを準備するために不可欠な連続手順です。 この記事では、このプロセスに関連する基本的なステップを紹介します。 次に、特に焦点を当てて、組織の保存と正確な組織学的解釈を成功させるための基礎を築く最初のステップである固定の決定的な重要性を探ります。

組織処理ステップの紹介

組織処理は、新鮮な組織を簡単に切断および染色できる形に変換することにより、顕微鏡検査のために組織標本を準備する組織学の重要なステップです。 目標は、組織の構造と細胞の詳細を保存し、正確な診断と研究に適したものにすることです。 プロセス全体にはいくつかの重要なステップがあります。 組織処理の各ステップは、サンプルの顕微鏡の詳細を保存し、正確な病理学的評価を確保するために不可欠です。

固定

これは、腐敗を防ぎ、構造的完全性を維持するために組織を保存する最初の最も重要なステップです。 ホルマリンのような一般的な固定剤は、酵素活性と細菌の増殖を停止し、さらなる処理のために組織を安定させるのに役立ちます。

脱水

アルコール濃度の増加を使用して、組織から水を除去します。 パラフィンのような埋め込み媒体は水溶性ではないので、歪みのない次のステップのために組織を準備するために完全な脱水が必要である。

クリア

組織内のアルコールは、アルコールとパラフィンの両方と互換性のあるクリアリング剤、通常はキシレンまたはキシレン代替品に置き換えられます。 クリアリングは組織を半透明にし、浸透の準備をします。

潜入

組織は溶融パラフィンワックスで飽和しています。 このプロセスにより、組織の内部構造を失うことなく、顕微鏡分析のために超薄型セクションにスライスするのに十分な硬さが組織に与えられます。

埋め込み (ポスト処理ステップ)

処理後、組織はパラフィンブロックに埋め込まれます。 このステップは、組織がミクロトームで切断されてスライドに取り付けられる前に、組織を正しく整列させて方向付けます。

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組織処理で最も重要なステップは何ですか?

固定は最初のステップであり、組織の構造を保存し、劣化を防ぐ上で重要な役割を果たします。 これには、すべての生化学反応を停止し、細胞および組織の構造を安定させるために、化学物質 (一般的にはホルマリン (ホルムアルデヒド)) を使用することが含まれます。 なぜ固定がとても重要なのですか?

自己分解と生分解を防ぎます

細胞には、死後すぐに組織を分解 (自己分解) できる酵素が含まれています。 すぐに修正されないと、これらの酵素は構造的損失を引き起こします。 固定はこれらのプロセスを停止します。 また、細菌の増殖 (腐敗) を防ぎ、組織の完全性をさらに保護します。

形態学を保存

適切な固定は、細胞と組織の正常な外観と関係を維持します。 これにより、核、細胞質、細胞外マトリックスなどの診断機能が顕微鏡下ではっきりと見えるようになります。

試薬浸透を有効にする

よく固定された組織により、試薬 (アルコールやパラフィンなど) は後の段階で効果的に浸透します。 不十分に固定された組織は、拡散チャネルをブロックし、不完全な脱水、除去、および浸透につながる可能性があります。

高品質の染色をサポート

ヘマトキシリンやエオシン (H & E) などの多くの組織学的染色は、透明で鮮明で解釈可能な染色を生成するために適切な固定に依存しています。 不適切な固定は、弱い、不均一、または誤った染色結果をもたらす可能性があります。

不可逆的な影響

後のステップ (脱水やクリアなど) とは異なり、固定のエラーは修正できません。 組織が固定不足または固定過剰になると、その構造は永続的になる可能性がありますNtly全体の診断プロセスに影響を与える変更または破壊。

組織処理における固定プロセス

固定は組織処理の基本的なステップであり、組織標本を可能な限り生命のような状態に近い状態で保存するのに役立ちます。 組織が体から除去されると、酵素活性 (自己分解) と細菌侵入 (腐敗) により、組織は急速に分解し始めます。 これを防ぐには、組織を固定液 (通常は10% 中性緩衝ホルマリン) にすばやく入れる必要があります。 この化学物質は、タンパク質と細胞構造を安定させ、組織を現在の状態に効果的に「ロック」して、崩壊を防ぎ、微視的評価のために形態を維持します。

固定する前に、組織は通常、小さくて薄いセクションにトリミングされます。通常は3〜5ミリメートル以下です。 これにより、固定剤がサンプル全体に均等かつ効率的に浸透できるようになります。 使用される固定剤の量も重要であり、組織の量の少なくとも10〜20倍でなければなりません。 浸されると、標本は、組織の種類、サイズ、および望ましい保存レベルに応じて、指定された期間 (多くの場合6〜24時間) 固定液に残ります。 固定不足は組織を破壊しやすくする可能性がありますが、過剰固定は細胞の詳細の硬化またはマスキングを引き起こす可能性があります。

固定後、組織をすすぎ、余分な固定剤を取り除き、脱水、透明化、パラフィン浸透などのその後の処理ステップのために準備することができます。 適切な固定は、構造の詳細を維持するだけでなく、染色の質と切断の容易さにも大きな影響を与えます。 すべての下流プロセスは十分に固定された組織に依存しているため、固定は組織学的分析のための組織準備において最も重要なステップと見なされます。

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